CAS 7240-90-6 5-برومو-4-كلورو-3-إندوليل-بيتا-دي-جالاكتوسيد X-GAL

5- برومو - 4 - كلورو - 3 - إندوليل بيتا - D - غالاكتوسيد (X - Gal) هو الركيزة المستخدمة عادة في علم الأحياء الجزيئية والكيمياء الحيوية للكشف عن نشاط إنزيم β - galactosidase.يستخدم على نطاق واسع في الاختبارات التي تنطوي على تحليل التعبير الجيني وتوطين البروتين.

هنا بعض النقاط الرئيسية عن إكس-غال:

1. المبدأ: X-Gal هو الركيزة عديمة اللون التي ، في وجود β-galactosidase ، يتم هيدروليزها للحصول على منتج أزرق.يسمح هذا التفاعل الإنزيمي باكتشاف نشاط β-galactosidase في الخلايا أو الأنسجة.

2. التطبيق: غالبًا ما يتم استخدام X-Gal جنبًا إلى جنب مع جين lacZ ، الذي يشفّر عن β-galactosidase. في علم الأحياء الجزيئي ، يستخدم الباحثون عادة lacZ كجين مراسل لدراسة التعبير الجيني ،نشاط المروج، وتوطين البروتين. يمكن أن يكشف تلوين X-Gal عن وجود ونشاط β-galactosidase ، مما يشير إلى التعبير عن جين lacZ.

3. تطور اللون: عندما يتم هيدروليز X-Gal بواسطة β-galactosidase ، فإنه ينتج منتجًا أزرقًا يسمى 5,5'-dibromo-4,4'-dichloroindigo.هذا اللون الأزرق يمكن اكتشافه بصريًا ويسمح بتحليل نوعي لنشاط β-galactosidase.

4. خصائص الركيزة: يتم تقسيم X-Gal خصيصًا بواسطة β-galactosidase ولا يتم هيدروليزه بواسطة معظم الإنزيمات الشائعة الأخرى ،مما يجعلها رصيد محدد وموثوق به للكشف عن نشاط β-galactosidase.

5. المعالجة والتخزين: عادة ما يكون X-Gal متوفرًا على شكل مسحوق يمكن إذابته في محلول مناسب ، مثل dimethylformamide (DMF) أو dimethyl sulfoxide (DMSO) ، لإعداد محلول أساسي.يجب تخزينها عند -20 درجة مئوية في بيئة جافة ومظلمة للحفاظ على استقراره.

6. الاحتياطات الأمنية: كما هو الحال مع أي عامل كيميائي، من المهم اتباع بروتوكولات السلامة المناسبة عند التعامل مع إكس غال. تجنب الاتصال المباشر بالجلد، العينين، أو البلع،والعمل في منطقة جيدة التهوية.

تم استخدام إكس-غال على نطاق واسع في مختلف مجالات البحث، بما في ذلك علم الأحياء الجزيئي والوراثة وعلم الأحياء التنموي، كأداة قيمة لرؤية ودراسة أنماط التعبير الجيني.