في مجال التحليل الحيوي الحديث والتشخيص الطبيأصبح الاختبار المناعي الكيميائي الضوئي (CLIA) طريقة اكتشاف لا غنى عنها مع مزاياها العديدة مثل الحساسية العالية والخصوصية القويةوباعتبارها العنصر الأساسي لهذه التكنولوجيا، فإن أداء المفاعل الكيميائي المضيء المستخدم كتسمية يحدد مباشرة نتائج الاختبار.دعونا نتحدث عن الشروط الرئيسية التي يجب أن تستوفي المفاعل الكيميائي المضيء المستخدم كتسمية.
1القدرة على المشاركة في ردود الفعل الكيميائية
1) أساس مبدأ التفاعل: يجب أن يكون للمفاعلات الكيميائية المضيئة الخصائص المتأصلة للقدرة على المشاركة في التفاعلات الكيميائية المضيئة.الذي هو الجذر لتوليد إشارات الكشفخذ استر الأكريدينيوم كمثال. كجزء مثالي نسبيا من الركيزة المضيئة ، يمكن أن يتم أكسدة بواسطة بيروكسيد الهيدروجين في بيئة قاعية لإصدار الضوء.تتضمن هذه التفاعل التثبيطي عملية نقل الإلكترونات، كسر وتشكيل الروابط الكيميائية، ويؤدي في نهاية المطاف إلى إطلاق الطاقة في شكل ضوء.مثل مجموعة الإستير النشطة في إستير الأكريدينيوم، هي مواقع رئيسية لبدء التفاعلات. يمكنها التفاعل بشكل خاص مع المواد المأكسة لبدء آلية الإشعاع.فقط مع مثل هذا التفاعل يمكن للمستجيب الكيميائي الإشعاعي أن يولد إشارات ضوئية في الوقت المناسب ودقة في نظام الاختبار المناعي وفقًا لحدث الارتباط المحدد للمضاد المضاد.
تأثير على حساسية الكشف: إن كفاءة المفاعل في التفاعل الكيميائي المضيء ترتبط ارتباطًا وثيقًا بالحساسية.فعالية عالية تعني أن عملية الإشعاع يمكن أن تبدأ بسرعة في وجود تركيز أقل من المفاعلات لإنتاج كثافة ضوئية قابلة للكشففي التشخيص السريري، للكشف عن بعض العلامات الحيوية، مثل علامات الأورام والهرمونات،مطلوب أن تكون المفاعلات الكيميائية المضيئة قادرة على التقاط التغيرات الدقيقة الناجمة عن ربط المضاد بالمضاد، وحتى لو كان المحتوى المستهدف في العينة منخفضًا للغاية ، فيمكن أن ينعكس عن طريق إشارة مضيئة قوية ومستقرة. إذا كان للمعامل الكيميائي المضيء فعالية ضعيفة ،قد يسبب ضوء ضعيف أو غير مستقرمما يجعل من الصعب على نظام الكشف التمييز بين الإشارات و ضوضاء الخلفية ، وبالتالي فقدان معلومات تشخيصية مهمة.
2المفاعلات التي يمكن أن تشكل مركبات مستقرة بعد التزاوج مع المضادات أو الأجسام المضادة
يعد ربط المفاعلات الكيميائية المضيئة مع المضادات أو الأجسام المضادة خطوة أساسية في بناء نظام تحليل المناعة ، ومن المهم تشكيل مركب مستقر.هذا يتطلب تكنولوجيا الارتباط الكيميائي المتطورةعلى سبيل المثال، التفاعلات الكيميائية بين الجماعات النشطة، مثل تفاعل التكثيف بين الجماعات الأمينية والكاربوكسيل، تفاعل الإضافة بين الثيول وماليميد، الخ.يمكن استخدامه لتحقيق اتصال مكافئ بين الاثنينأثناء عملية الاقتراب، فإن ظروف التفاعل، بما في ذلك درجة الحرارة، قيمة الـ pH، تركيز المفاعل، إلخ.يجب أن يتم التحكم فيها بدقة لضمان انتقائية وكفاءة تفاعل الارتباط.
من جمع العينات، والتخزين إلى الكشف، يجب أن يتحمل المركب اختبار عوامل بيئية مختلفة، مثل تقلبات درجة الحرارة، والتغيرات في درجة الحموضة في المحلول، الخ.إذا كان الجمع غير مستقر بشكل جيد، يمكن أن تنفصل بسبب تغيرات طفيفة في درجة الحرارة أثناء نقل العينة ، مما يتسبب في انفصال عامل التفاعل الكيميائي من المضاد أو الجسم المضاد ،والذي لن يقلل فقط من حساسية الكشفو لكن يمكن أن يسبب نتائج سلبية كاذبة
3تأثير الكم العالي وديناميكية التفاعل لا تزال تحتفظ بعد الارتباط
يحدد التأثير الكمي كفاءة توليد الفوتونات للمستجيب الكيميائي الضوئي خلال عملية الضوء.يجب أن تحتفظ المفاعل بعد الاقتراب بأعلى تأثير كمومي ممكن، أي أن عدد الفوتونات المولدة لكل وحدة تفاعل كيميائي يجب أن يكون كبيراً. بالنسبة لبعض العينات البيولوجية المعقدة ، هناك العديد من المواد المتداخلة ، مثل البروتينات والأحماض النووية ،الميتابوليتات، الخ هذه المواد قد تمتص وتشتت الضوء، مما يقلل من شدة إشارة الكشف.المفاعلات الكيميائية المضيئة ذات التأثير الكمي العالي يمكنها تسليط الضوء على الإشارة المستهدفة في مثل هذه البيئة المعقدة مع قدرتها على توليد الفوتونات بكفاءة عالية، مما يسهل على نظام الكشف تحديد وتحديدها.
4يجب عدم تغيير الخصائص الفيزيائية والكيميائية للشيء المسجل أو تغييرها قليلاً
حماية النشاط المناعي للشيء الملصق هي واحدة من المبادئ الأساسية لتطبيق المفاعلات الكيميائية.النشاط المناعي للمستضد هو أساس التعرف عليه والارتباط به بواسطة الأجسام المضادة المحددة، والنشاط المناعي للجسم المضاد مرتبط بقدرته على التقاط المضاد بدقة.بمجرد أن يغير المفاعل الكيميائي الضوئي بشكل مفرط الخصائص الفيزيائية والكيميائية للجسم المسجل أثناء عملية الارتباط، مثل التسبب في تشوه تشكل المضاد وتغطية موقع الارتباط للجسم المضاد ، سوف يقل صلة المضاد بالجسم المضاد ،وحتى القدرة على الاستجابة المناعية ستفقد.
اتصل شخص: Maggie Ma
الهاتف :: +0086 188 7414 9531