أخبار الشركة عن من التوليف إلى التنقية: النقاط الرئيسية لمراقبة الجودة في عملية إنتاج عازل HEPES

في مجال الكيمياء الحيوية والبيولوجيا الجزيئية ، يستخدم عازل HEPES (4- ((2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid) على نطاق واسع في زراعة الخلايا ، أبحاث البروتين ،مجموعات التشخيص الكيميائي الحيوي والسيناريوهات الأخرى بسبب قدرتها الجيدة على التخزين، عدم السمية للخلايا والتوافق البيولوجي الجيد. ضمان جودة عازل HEPES أمر حاسم لدقة تجارب البحث العلمي ذات الصلة واستقرار المنتجات البيولوجية.كل هذا يبدأ مع مراقبة صارمة للجودة في عملية إنتاجها من التوليف إلى التنقية، والتي سيتم تحليلها بالتفصيل أدناه.

1عملية التوليف والارتباط الجودة من HEPES العازل
التوليف مع هيدروكسي إيثيل بيبيرازين وكلوروتانيسولفونات الصوديوم كمواد خام: في هذه الطريقة،الهيدروكسي إيثيل بيبيرازين والصوديوم كلورو إيثانيسولفونات تخضع لرد فعل الاستبدال في ظل ظروف رد فعل مناسبةفي هذه العملية، درجة حرارة التفاعل، وقت التفاعل والنسبة المولية للمواد الخام هي العوامل الرئيسية التي تؤثر على عملية التفاعل ونقاء المنتج.قد يسبب ردود فعل جانبية، وتوليد الشوائب، وتقليل نقاء هيبس؛ إذا كان وقت التفاعل قصير جدا، فإن التفاعل غير مكتمل والإنتاج ينخفض.
طريق التوليف لـ isethionate الصوديوم و ethylpiperazine: يتضمن طريق التوليف هذا عدة خطوات. أولاً ، يحتاج isethionate الصوديوم إلى التنشيط في ظل ظروف محددة ،ومن ثم يتم تكثيفها مع إيثيلبيبرازينفي مرحلة التنشيط، فإن اختيار الجرعة من المنشط سوف تؤثر على نشاط إيزيثيونات الصوديوم، ومن ثم تؤثر على تأثير تفاعل التكثيف اللاحق.خلال تفاعل التكثيف، يلعب الحموضة الحمضية لنظام التفاعل دورا هاما في معدل التفاعل وهيكل المنتج.هناك حاجة إلى منظم حمض وقاعدة لتحقيق الاستقرار في قيمة pH لنظام التفاعل في نطاق pH مناسب.

2تأثير عملية التطهير على جودة عازل HEPES

1طريقة التبلور: تتم التبلور باستخدام الفرق في ذوبان HEPES في محلولات مختلفة وفي درجات حرارة مختلفة.يتم إذابة المنتج الخام المصنوع في محلول مناسب، ويتم تبلور HEPES تدريجياً وتساقطه عن طريق تبريد المذيب ببطء أو تبخيره ، بينما تبقى الشوائب في السائل الأم.هذه الطريقة لديها متطلبات عالية للغاية لمراقبة درجة الحرارةقد تؤدي التغيرات السريعة جداً في درجة الحرارة إلى سرعة التبلور غير متساوية، مما يؤثر على نقاء وشكل الجسيمات في البلورات.

2- تصنيف الكروماتوجرافية لتبادل الأيونات: يتم الفصل على أساس قدرات الامتصاص والإزالة المختلفة لـ HEPES والشوائب على الراتنجات المتبادلة للأيونات.عندما يمر محلول مختلط يحتوي على HEPES والشوائب من خلال عمود الراتنج تبادل الأيونات، فإن الهيبس والشوائب سوف تتبادل وتمتص مع الأيونات على الراتنج بدرجات مختلفة.يمكن أن يتم إزالة HEPES بشكل انتقائي لتحقيق الغرض من التنقيةومع ذلك، تتطلب هذه الطريقة التحكم الدقيق في المعلمات مثل معدل تدفق وتركيز المادة المرفوعة، وإلا فإن فصل HEPES والشوائب قد لا يكون كامل.

3- فحص الجودة ومراقبة أثناء الإنتاج

(أ) فحص مؤشرات الجودة الرئيسية

1فحص النقاء: الكروماتوجرافية السائلة عالية الأداء (HPLC) هي طريقة شائعة للكشف عن نقاء HEPES.يتم فصل HEPES والشوائب وفقا لفترات الاحتفاظ المختلفة على العمود الكروماتوغرافي، ومن ثم يتم الكشف عن محتوى كل عنصر بواسطة جهاز الكشف ، بحيث يتم حساب نقاء HEPES بدقة.

2اكتشاف الـ pH: قيمة الـ pH لمعازف HEPES مرتبطة مباشرة بأداء العازلة.استخدم مقياس دقة للحموضة لقياس قيمة حموضة محلول HEPES في ظل ظروف محددة لتحديد ما إذا كانت ضمن النطاق القياسيبالنسبة لمنتجات HEPES ذات الاستخدامات المختلفة ، فإن معايير قيمة الحموضة تختلف قليلاً.يتطلب HEPES المستخدم في ثقافة الخلايا أن تكون قيمة pH ضمن نطاق pH المطبق لثقافة الخلايا المحددة لضمان استقرار بيئة نمو الخلايا.

3اكتشاف محتوى النجاة: استخدام طيف امتصاص ذري (AAS) ،طيف الكتلة البلازما المرتبط بالتحفيز (ICP-MS) وتقنيات أخرى للكشف عن محتوى الشوائب المعدنية الثقيلة (مثل الرصاص)، الزئبق، الكادميوم، الخ) ؛ استخدام التوربيديميتريا أو الكروماتوجرافيا الأيونية للكشف عن محتوى الشوائب الأنيونية مثل الكبريت.يمكن أن يمنع التحكم الصارم بمحتوى الشوائب من التدخل في التجارب أو عمليات الإنتاج اللاحقة.